Kuna valgupeptiidravimid on enamasti bioaktiivsed ained

Kuna valkpeptiidravimid on enamasti bioaktiivsed ained ja bioloogiline aktiivsus ei sõltu ainult ravimi primaarsest struktuurist, vaid on tihedalt seotud ka sekundaarsete ja tertsiaarsete struktuuridega, on bioanalüüs ainulaadne ja vajalik meetod selle klassi farmakokineetika uurimiseks. Biotestidel on kaks eesmärki: otseselt määrata ravimite kontsentratsiooni kehavedelikes ja tuvastada märgistatud ravimite bioloogiline aktiivsus. Selle meetodid võib jagada kahte põhikategooriasse.
1.1.1 In vivo analüüs Tavapärane hiire veresuhkru määramise meetod insuliiniga jne, lisaks erinevatele meetoditele, mis on kindlaks määratud erinevat tüüpi valgu polüpeptiidide, näiteks IL-8 mobilisatsioonineutrofiilide bioloogilise aktiivsuse järgi küülikukatsetes IL-8 olemuse tõttu võib mobiliseerida luust suure hulga neutrofiile [1]. Seda tüüpi meetod peegeldab kõige intuitiivsemalt bioloogilist aktiivsust, kuid hõlmab kogu looma, on aeganõudev ja töömahukas, madala tundlikkusega ja suure varieeruvusega.
1.1.2 In vivo koe (raku) analüüs, nagu NGF, stimuleerib kana seljajuure ganglionide kasvu, oksütotsiin roti ex vivo emakameetodil jne. Molekulaarbioloogia arenguga on loodud palju spetsiifilisi ja tundlikke sõltuvaid rakuliine, ja rakukultuurist on saanud kõige levinum meetod. Vastavalt valgupeptiidide ja rakkude interaktsiooni erinevatele mehhanismidele on palju spetsiifilisi operatsioone. Näiteks proliferatsioonitestid, mis on kiired ja tundlikud, kuid veidi vähem spetsiifilised; Antiproliferatsiooni tuvastussüsteem on lihtne, tundlik ja spetsiifiline; Tsütopaatilise toime vähendamise testid [2], mis põhinevad viirusevastase toimega ravimitel, nagu interferoon, kaitsevad rakke viiruskahjustuste eest, meetod on intuitiivne ja tundlik, kuid peptiidide alatüübid võivad seda häirida. Eeltoodud meetodid põhinevad rakkude arvu suurendamisel ja vähendamisel kui kvantitatiivsetel ja efektiivsetel näitajatel ning loendusmeetodid hõlmavad otseloendusmeetodit ja kaudset loendusmeetodit, viimane hõlmab MTT meetodit, isotoopide (3H, 14C) inkorporeerimise meetodit jne. Lisaks on olemas testid, mis põhinevad munavalgete polüpeptiidide kaudsel interaktsioonil rakkudega, näiteks antikehade indutseerimise meetod kombineerituna immuuntuvastusega [3], ensüümi indutseeritud lagunemismeetod kombineerituna ensüümreaktsiooniga [4] ja nii edasi. Üldiselt on rakukultuurimeetodite eelisteks tundlikkus ja spetsiifilisus, objektiivsus ja usaldusväärsus, kuid ka nende puudused on ilmsed. Esiteks ei saa biotestid kvantifitseerida inaktiivseid väikeseid metaboliite ega jälgida nende dünaamikat in vivo; Teiseks esinevad proovid enamasti inimese või looma seerumis ning seerumis sisalduvate endogeensete ainete interferents ja võimalike endogeensete tegurite ristreaktsioon mõjutavad meetodi spetsiifilisust. Lisaks on bioloogiliste protsesside käivitamiseks sageli vaja läve tsütokiine, mis vähendab meetodi tundlikkust; Sõltuvate tüverakkude pikaajaline kultiveerimine on altid mutatsioonidele, mis mõjutavad testi spetsiifilisust.